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用1500μW/cm2的紫外线照射长牡蛎(Crassostrea gigas)精子60 s以进行灭活处理,并使之与栉孔扇贝(Chlamys farreri)卵子受精,在卵子受精后排出第一极体前用6-DMAP(50 mg/L)处理受精卵,持续处理35 min,抑制第一极体和第二极体的排放,诱导异精雌核发育四倍体。采用二脒基苯基吲哚(DAPI)荧光染色显微观察法,对灭活的长牡蛎精子诱导的栉孔扇贝雌核发育四倍体早期胚胎发育过程进行细胞学观察。结果表明:经紫外线灭活过的长牡蛎精子进入栉孔扇贝卵子后发生轻微膨胀;在第一次卵裂中期,精核形成一致密的染色质小体(DCB),位于两组分开的母本染色体之间,不参与核分裂;第一次卵裂结束时DCB滞留于两卵裂球的分裂沟上或进入其中一分裂球中;第二次卵裂过程中,DCB的去向与第一次卵裂时基本一致。6-DMAP处理有效地抑制了第一极体和第二极体的排出,从而使雌核四倍化。对担轮幼虫染色体倍性分析结果表明,通过本方法可以获得6.25%的四倍体幼虫。本研究还对灭活的异源长牡蛎精子诱导栉孔扇贝雌核发育四倍体过程中产生的复杂倍性、核物质分离紊乱及多精附卵现象进行了观察和分析。 相似文献
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农民专业合作经济组织是由从事同类农产品生产经营的农民自愿组织起来.在农业生产经营的产前、产中、产后等环节实行资金、技术、信息、生产、供销等互助合作与服务的经济组织,是市场经济条件下,农民进行自我服务、自我发展、自我保护的一种行之有效的组织形式。在对南京牛首农副产品合作社进行专题调研的基础上,拟从南京牛首农副产品合作社的实践分析入手,提出进一步发展壮大江宁区农民专业合作经济组织对策和建议。 相似文献
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源于马铃薯Y病毒CP基因的dsRNA原核表达及提取 总被引:1,自引:1,他引:0
以马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)为基础构建了含PVY CP基因3’端253bp反向重复片段的双链RNA(dsRNA)原核表达载体,并转化大肠杆菌HT115(DE3),经IPTG诱导产生dsRNA,用LiCl沉淀法提取,获得了高质量的dsRNA。 相似文献
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AIM: To explore the possibility of differentiating functional insulin-producing cells from human BM-derived stem cells. METHODS: Mesenchymal stem cells were isolated from human bone marrow. Then these cells were induced with epidermal growth factor, β-mercaptoethanol and high concentration of glucose. The gene expression related to islet β cells was detected by RT-PCR. Insulin in the treated cells was examined by immunocytochemistry. In addition, the levels of insulin secretion and glucose-stimulated insulin release were examined by microparticle enzyme immunoassay. Finally, the induced cells were implanted into the right renal subcapsular space of diabetic mice. Blood glucose levels were monitored 16 d after implantation. The right kidneys of the treated mice were harvested for immunohistochemistry. RESULTS: The key genes related to pancreatic β cells had been confirmed to express by PCR and insulin was detected by immunocytochemistry in differentiated human BM-derived stem cells induced by high glucose, which responded to glucose challenge. Furthermore, implantation of the cells in renal subcapsular space was able to lower the glucose levels in hyperglycemic mice. After 16 days, the implanted cells were determined still to be insulin positive cells by immunohistochemistry. CONCLUSION: These results indicate human BM-derived stem cells are capable of differentiating into functional insulin-producing cells and may represent a pool of cells for the treatment of diabetes. 相似文献
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